BANDYMO SANTRAUKA IR PAAIŠKINIMAS
Maliarija yra uodų platinama hemolizinė, karščiuojanti liga, kuria per metus užsikrečia daugiau nei 200 milijonų žmonių ir miršta daugiau nei 1 milijonas žmonių.Jį sukelia keturios Plasmodium rūšys: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ir P. malariae.Visos šios plazmodijos užkrečia ir sunaikina žmogaus eritrocitus, sukeldamos šaltkrėtį, karščiavimą, anemiją ir splenomegaliją.P. falciparum sukelia sunkesnę ligą nei kitos plazmodinės rūšys ir daugiausiai mirčių nuo maliarijos.P. falciparum ir P. vivax yra labiausiai paplitę patogenai, tačiau yra didelių geografinių rūšių pasiskirstymo skirtumų.
Tradiciškai maliarija diagnozuojama demonstruojant organizmus ant Giemsa nudažytų tirštų periferinio kraujo tepinėlių, o skirtingos plazmodžio rūšys išsiskiria pagal jų atsiradimą užkrėstuose eritrocituose.Ši technika gali tiksliai ir patikimai diagnozuoti, tačiau tik tada, kai ją atlieka kvalifikuoti mikroskopai, naudodami apibrėžtus protokolus, o tai kelia didelių kliūčių atokiose ir skurdžiose pasaulio vietose.
Maliarijos Pf/Pv Ag greitasis testas sukurtas šioms kliūtims išspręsti.Jame naudojami antikūnai, specifiniai P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) ir P. vivax laktato dehidrogenazei (Pv-LDH), kad vienu metu aptiktų ir atskirtų infekciją P. falciparum ir P. vivax.Tyrimą gali atlikti neapmokytas arba minimalios kvalifikacijos personalas, be laboratorinės įrangos
PRINCIPAS
Maliarijos Pf/Pv Ag greitasis testas yra šoninio srauto chromatografinis imunologinis tyrimas.Bandymo juostelės komponentus sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra pelės anti-Pv-LDH antikūnas, konjuguotas su koloidiniu auksu (Pv-LDH-aukso konjugatai) ir pelės anti-pHRP-II antikūnas, konjuguotas su koloidiniu auksu (pHRP-II-aukso konjugatai), 2) kontrolinė membrana (P juostelė ir celiuliozės juosta svC) juosta).Pv juosta iš anksto padengta kitu pelės anti-Pv-LDH specifiniu antikūnu Pv infekcijai nustatyti, Pf juosta padengta polikloniniais anti-pHRP-II antikūnais Pf infekcijai nustatyti, o C juosta padengta ožkos anti-pelės IgG.
Tyrimo metu į tiriamosios kasetės mėginio šulinėlį (S) išleidžiamas atitinkamas kraujo mėginio tūris, į buferio šulinėlį (B) įpilamas lizės buferis.Buferyje yra ploviklio, kuris lizuoja raudonuosius kraujo kūnelius ir išskiria įvairius antigenus, kurie kapiliariniu būdu migruoja per juostelę, esančią kasetėje.Pv-LDH, jei yra mėginyje, jungsis su Pv-LDH-aukso konjugatais.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtu anti-Pv-LDH antikūnu, sudarydamas bordo spalvos Pv juostą, rodančią Pv teigiamą testo rezultatą.Arba pHRP-II, jei jo yra mėginyje, prisijungs prie pHRP-II-aukso konjugatų.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtais anti-pHRP-II antikūnais, suformuojant bordo spalvos Pf juostą, rodančią teigiamą Pf testo rezultatą.Bet kokių bandymo juostų nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.Teste yra vidinė kontrolė (C juosta), kurioje turėtų būti bordo spalvos ožkos antipelės IgG / pelės IgG (anti-Pv-LDH ir anti-pHRPII)-aukso konjugatų imunokomplekso juosta, neatsižvelgiant į bet kurios bandomosios juostos spalvos raidą.Priešingu atveju tyrimo rezultatas negalioja ir mėginys turi būti iš naujo patikrintas kitu prietaisu.
