BANDYMO SANTRAUKA IR PAAIŠKINIMAS
Maliarija yra uodų platinama hemolizinė, karščiuojanti liga, kuria per metus užsikrečia daugiau nei 200 milijonų žmonių ir miršta daugiau nei 1 milijonas žmonių.Jį sukelia keturios Plasmodium rūšys: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ir P. malariae.Visos šios plazmodijos užkrečia ir sunaikina žmogaus eritrocitus, sukeldamos šaltkrėtį, karščiavimą, anemiją ir splenomegaliją.P. falciparum sukelia sunkesnę ligą nei kitos plazmodinės rūšys ir daugiausiai mirčių nuo maliarijos.P. falciparum ir P. vivax yra labiausiai paplitę patogenai, tačiau yra didelių geografinių rūšių pasiskirstymo skirtumų.
Tradiciškai maliarija diagnozuojama demonstruojant organizmus ant Giemsa nudažytų storų periferinio kraujo tepinėlių, o skirtingos plazmodžio rūšys išsiskiria pagal jų atsiradimą užkrėstuose eritrocituose1.Ši technika gali tiksliai ir patikimai diagnozuoti, tačiau tik tada, kai ją atlieka kvalifikuoti mikroskopai, naudodami apibrėžtus protokolus2, o tai kelia didelių kliūčių atokiose ir skurdžiose pasaulio vietose.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit yra sukurtas šioms kliūtims išspręsti.Atliekant testą, naudojama pora monokloninių ir polikloninių antikūnų prieš P. falciparum specifinį baltymą, histidino kartotinį baltymą II (pHRP-II) ir porą monokloninių antikūnų prieš plazmodžio laktato dehidrogenazę (pLDH), baltymą, kurį gamina keturios plazmodiumo rūšys, todėl galima aptikti ir simuliuoti bet kokią kitą P. falciparum infekciją. plazmodija.Tai gali atlikti neapmokytas arba minimalios kvalifikacijos personalas, be laboratorinės įrangos.
PRINCIPAS
Pf/Pan Malaria Rapid Test rinkinys yra šoninio srauto chromatografinis imunologinis tyrimas.Bandymo juostelės komponentus sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra pelių anti-pHRP-II antikūnas, konjuguotas su koloidiniu auksu (pHRP II-aukso konjugatai) ir pelės anti-pLDH antikūnas, konjuguotas su koloidiniu auksu (pLDH-aukso konjugatai),
2) nitroceliuliozės membranos juostelė, kurioje yra dvi bandomosios juostos (Pan ir Pv juostos) ir kontrolinė juosta (C juosta).Pan juosta iš anksto padengta monokloniniu anti-pLDH antikūnu, kuriuo galima aptikti infekciją bet kuria iš keturių rūšių plazmodijų, Pf juosta iš anksto padengta polikloniniais anti-pHRP-II antikūnais Pf infekcijai nustatyti, o C juosta padengta ožkos anti-pelės IgG.
Tyrimo metu į tiriamosios kasetės mėginio šulinėlį (S) išleidžiamas atitinkamas kraujo mėginio tūris, į buferio šulinėlį (B) įpilamas lizės buferis.Buferyje yra ploviklio, kuris lizuoja raudonuosius kraujo kūnelius ir išskiria įvairius plazmodžio antigenus, kurie kapiliariniu būdu migruoja per juostelę, esančią kasetėje.Jei pHRP-II yra mėginyje, jis prisijungs prie pHRP II-aukso konjugatų.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtais anti-pHRPII antikūnais, sudarydami bordo spalvos Pf juostą, rodančią teigiamą Pf testo rezultatą.Jei pLDH yra mėginyje, jis prisijungs prie pLDH aukso konjugatų.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtu anti-pLDH antikūnu, sudarydamas bordo spalvos Pan juostą, rodančią teigiamą plazmodžio testo rezultatą.Jei Pan juostos nėra, galima rekomenduoti teigiamą bet kurios iš kitų trijų plazmodijų tyrimo rezultatą.
Bet kokių bandymo juostų (Pan ir Pf) nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.Teste yra vidinė kontrolė (C juosta), kurioje turėtų būti bordo spalvos ožkos anti-pelės IgG / pelės IgG (pHRP-II ir pLDH-aukso konjugatų) imunokomplekso juostelė, neatsižvelgiant į bet kurios bandomosios juostos spalvos raidą.Priešingu atveju tyrimo rezultatas negalioja ir mėginys turi būti iš naujo patikrintas kitu prietaisu.
