BANDYMO SANTRAUKA IR PAAIŠKINIMAS
Maliarija yra uodų platinama hemolizinė, karščiuojanti liga, kuria per metus užsikrečia daugiau nei 200 milijonų žmonių ir miršta daugiau nei 1 milijonas žmonių.Jį sukelia keturios Plasmodium rūšys: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ir P. malariae.Visos šios plazmodijos užkrečia ir sunaikina žmogaus eritrocitus, sukeldamos šaltkrėtį, karščiavimą, anemiją ir splenomegaliją.P. falciparum sukelia sunkesnę ligą nei kitos plazmodialinės rūšys ir dažniausiai miršta nuo maliarijos, be to, tai yra vienas iš dviejų labiausiai paplitusių maliarijos sukėlėjų.
Tradiciškai maliarija diagnozuojama demonstruojant organizmus ant Giemsa nudažytų tirštų periferinio kraujo tepinėlių, o skirtingos plazmodžio rūšys išsiskiria pagal jų atsiradimą užkrėstuose eritrocituose.Ši technika gali tiksliai ir patikimai diagnozuoti, tačiau tik tada, kai ją atlieka kvalifikuoti mikroskopai, naudodami apibrėžtus protokolus, o tai kelia didelių kliūčių atokiose ir skurdžiose pasaulio vietose.
Pf Ag greitasis testas sukurtas šioms kliūtims išspręsti.Jis aptinka specifinį Pf antigeną pHRP-II žmogaus kraujo mėginyje.Tai gali atlikti neapmokytas arba minimalios kvalifikacijos personalas, be laboratorinės įrangos.
PRINCIPAS
Pf Ag greitasis testas yra šoninio srauto chromatografinis imunologinis tyrimas.Bandymo juostelės komponentus sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra monokloninis anti-pHRP-II antikūnas, konjuguotas su koloidiniu auksu (pHRP II-aukso konjugatai), 2) nitroceliuliozės membranos juostelė, kurioje yra bandomoji juosta (Pf) ir kontrolinė juosta (C juosta).Pf juosta iš anksto padengta polikloniniais anti-pHRP-II antikūnais, o C juosta iš anksto padengta ožkos anti-pelės IgG.
Tyrimo metu į tiriamosios kasetės mėginio šulinėlį (S) išleidžiamas atitinkamas kraujo mėginio tūris, į buferio šulinėlį (B) įpilamas lizės buferis.Buferyje yra ploviklio, kuris lizuoja raudonuosius kraujo kūnelius ir išskiria pHRPII antigeną, kuris kapiliariniu būdu migruoja per juostelę, esančią kasetėje.Jei pHRP-II yra mėginyje, jis prisijungs prie pHRP II-aukso konjugatų.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtais polikloniniais antipHRP II antikūnais, suformuojant bordo spalvos Pf juostą, rodančią teigiamą Pf testo rezultatą.
Pf juostos nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.Teste yra vidinė kontrolė (C juosta), kurioje turėtų būti bordo spalvos ožkos anti-pelės IgG / pelės IgG imunokomplekso (pHRP II – aukso konjugatų) juosta, neatsižvelgiant į bet kurios Pf juostos spalvos išsivystymą.Priešingu atveju tyrimo rezultatas negalioja ir mėginys turi būti iš naujo patikrintas kitu prietaisu.
