BANDYMO SANTRAUKA IR PAAIŠKINIMAS
Visceralinė leišmaniozė arba Kala-azar yra išplitusi infekcija, kurią sukelia keli L. donovani porūšiai.Pasaulio sveikatos organizacijos (PSO) skaičiavimais, šia liga serga maždaug 12 milijonų žmonių 88 šalyse.Žmonėms juo užsikrečiama įkandus smėlynėms Phlebotomus, kurios užsikrečia maitindamosi užsikrėtusiais gyvūnais.Nors tai liga, paplitusi neturtingose šalyse, Pietų Europoje, ji tapo pagrindine oportunistine AIDS sergančių pacientų infekcija.L. donovani organizmo identifikavimas iš kraujo, kaulų čiulpų, kepenų, limfmazgių arba blužnies suteikia aiškų diagnozės vidurkį.Serologinis anti-L nustatymas.Nustatyta, kad donovani IgM yra puikus ūminės visceralinės leišmaniozės žymuo.Klinikoje naudojami testai yra ELISA, fluorescenciniai antikūnai arba tiesioginės agliutinacijos testai 4-5.Pastaruoju metu L. donovani specifinio baltymo panaudojimas bandyme labai pagerino jautrumą ir specifiškumą.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test – tai rekombinantiniais baltymais pagrįstas serologinis tyrimas, kuriuo vienu metu aptinkami IgG ir IgM antikūnai prieš L. Donovani.Testas užtikrina patikimą rezultatą per 15 minučių be jokių instrumentų.
PRINCIPAS
Leishmania IgG/IgM greitasis testas yra šoninio srauto chromatografinis imunologinis tyrimas.Bandymo kasetę sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra rekombinantinis L. donovani antigenas, konjuguotas su koloidiniu auksu (Leishmania konjugatai) ir triušio IgG-aukso konjugatai, 2) nitroceliuliozės membranos juostelė, kurioje yra dvi bandomosios juostos (T1 ir T2 juostos). ir valdymo juosta (C juosta).T1 juosta iš anksto padengta monokloniniu anti-žmogaus IgM, kad būtų galima nustatyti anti-L.donovani IgM, T2 juosta yra iš anksto padengta reagentais, skirtais anti-L aptikti.donovani IgG, o C juosta iš anksto padengta ožkos antitriušio IgG.
Kai į kasetės mėginio duobutę išleidžiamas pakankamas tiriamojo mėginio tūris, mėginys kapiliariniu būdu migruoja per kasetę.Jei mėginyje yra L. donovani IgM, jis prisijungs prie Leishmania konjugatų.Tada imunokompleksas sulaikomas ant membranos iš anksto padengtu anti-žmogaus IgM antikūnu, sudarydamas bordo spalvos T1 juostą, rodančią teigiamą L. donovani IgM testo rezultatą.L. donovani IgG, jei jo yra mėginyje, prisijungs prie Leishmania konjugatų.Tada imunokompleksą užfiksuoja iš anksto padengti reagentai ant membranos, sudarydami bordo spalvos T2 juostą, rodančią teigiamą L. donovani IgG testo rezultatą.
T juostų (T1 ir T2) nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.Teste yra vidinė kontrolė (C juosta), kurioje turėtų būti bordo spalvos ožkos antitriušio IgG/triušio IgG-aukso konjugato imunokomplekso juosta, neatsižvelgiant į bet kurios iš T juostų spalvos išsivystymą.Priešingu atveju tyrimo rezultatas neteisingas ir mėginys turi būti iš naujo patikrintas kitu prietaisu.
